1 实验方法与结果
1.1 多糖对实体型荷瘤小鼠（B16BL6）生长的影响作用
取C57BL6小鼠90只，雌雄各半，随机分为9组，每组10只，分别为多糖PI组（0.05、0.1、0.2g·kg-1）、多糖PII组（0.05、0.1、0.2 g·kg-1）、云芝多糖组（1.65g·kg-1）、5-FU组（0.02g·kg-1）、模型组（等体积NS），除5-FU组腹腔注射给药外，其余各组均灌胃给药。以0.25%胰酶消化贴壁生长良好的B16BL6黑色素瘤细胞，加培养液800rpm离心弃上清，再以无清培养基混悬细胞，调整细胞数。然后于每只小鼠右侧腹股沟皮下处接种细胞悬液0.2ml(约106个)，接种次日开始灌胃给药，连续20天，每日观察记录小鼠腹股沟皮下处生长情况、小鼠活动状态以及小鼠死亡情况。给药结束后处死小鼠，剥取分离瘤组织，以电子天平称重，记录瘤重。将瘤组织于50℃下干燥24小时，记录干重。计算抑瘤率。
抑瘤率=（1-给药组瘤重/模型组瘤重）×100%
表8-13多糖对实体型（B16BL6）荷瘤小鼠生长的抑制作用（X±SD）
组别
剂量（g/kg）
实体瘤重（湿重）
抑瘤率（%）
实体瘤重（干重）
模型组
5-FU
PI-1
PI-2
PI-3
PII-1
PII-2
PII-3
云芝多糖
——
0.02
0.20
0.10
0.05
0.20
0.10
0.05
1.65
5.399±1.205
1.218±0.439**
3.711±1.092*
4.309±0.800*
4.546±2.060
4.430±0.941*
4.397【用法】将所得的煎液分早、晚两次服完，服时可加适量白糖。连服1个月或长期服用。±1.207
6.202±1.190
4.266±1.180
将灵芝及生姜、胡椒、盐、酒放入鸡腹，并加适量的水，蒸至鸡烂熟。饮汤食鸡。【功效]脾虚气弱，饮食减少，消瘦乏力。灵芝蒸鸡脾虚气弱，饮食减少，消瘦乏力。100
77.4
31.3
20.2
15.8
17.9
18.6
——
21.0
1.715±0.207
0.959±0.068**
1.373±0.192**
1.434±0.243*
1.445±0.369
1.478±0.111*
1.469±0.362
1.737±0.183
1.470±0.325
注：*P<0.05，**P<0.01
在腹股沟处接种B16BL6细胞后约6天，开始有可触及之肿块，再往后肿块逐渐增大，到20天模型组肿块已大如桃核，在体生长良好。多糖给药组小鼠腹股沟处何首乌——滋补良药 推荐明星：王菲。王菲生产后的调理秘方中，何首乌是一味主药。每天吃，使她恢复了孕前的身材。 青春奇效：何首乌青春的功能是乌发，肿块生长与模型组小鼠接近，其生长速度较慢，表现为多糖PI、PII各剂量（除PII低剂量外）瘤重均较模型组小，其中PI高中剂量、PII高剂量瘤重与模型组比较有显著性差异（P<0.01，P<0.05），说明两多糖在抑制移植性实体型方面都有一定作用，以多糖PI为佳。
1.2 多糖对腹水型荷瘤小鼠（S180）生长的影响作用
取处于对数生长期的S180细胞，以0.25%胰酶消化，再以无清培养基稀释成细胞悬浮，将此细胞悬液腹腔注射接种到ICR小鼠体内，层流架中饲养观察，待小鼠腹部胀大时（即小鼠体内细胞已迅速增殖），准备第二次小鼠接种。
取ICR小鼠90只，雌雄各半，随机分为9组，每组10只，分别为多糖PI组（0.05、0.1、0.2g·kg-1）、多糖PII组（0.05、0.1、0.2g·kg-1）、云芝多糖组（0.4g·kg-1）、5-FU组、模型组（等体积NS），除5-FU组腹腔注射给药外，其余各组均灌胃给药。
取上述接种过并且生长正常的ICR小鼠，抽取腹水，以生理盐水稀释，制成细胞悬液并调整细胞数，每只小鼠腹腔注射接种细胞悬液0.2ml(约106个)，接种次日开始给药，连续20天，每日观察记录小鼠腹腔情况、活动状况以及小鼠死亡情况。根据小鼠死亡率采用卡方检验统计结果。
表8-14 腹水型荷瘤小鼠（S180）生长的抑制作用（X±SD，n=10）
组别
(g·kg-1)
死亡率
x2
模型组
5-Fu
PI-1
PI-2
PI-3
PII-1
PII-2
PII-3
云芝多糖
——
0.02
0.20
0.10
0.05
0.20
0.10
0.05
1.65
100%
20%
50%
60%
80%
70%
80%
100%
100%
——
13.33**
6.67**
5.00*
2.22
3.52
2.22
——
——
注：*P<0【制法】将灵芝加水煎浓，荸荠榨取汁，共同加温开水100毫升、白糖、香精搅匀。【用法】每日服2—3次。【功效】清热利尿，适用于崩、高。荸荠灵芝清热利尿，适用于崩、高。.05，**P<0.01
接种腹水型S180细胞的小鼠在十天后表现为腹部胀大，精神萎靡，活动减少，并逐渐开始出现死亡，在20天左右模型组小鼠全部死亡，多糖给药小鼠亦出现上述表现，但其死亡率有所下降，其中多糖PI高中剂量与模型组比较有明显差异，显示其能延缓小鼠的死亡时间，对有一定的抑制作用。
标签:抗灵芝多糖免疫
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本文关键词： 小鼠
多糖
接种
细胞